浅谈软组织肿瘤诊断中的五种检测“手段”

在软组织肿瘤的“迷人”世界里，相信每一名病理医生都会或多或少感到困惑；相信每一位因诊断困难的软组织肿瘤患者，都接受过使用多种方法检测辅助诊断的建议。

软组织肿瘤，即起源于纤维、脂肪、平滑肌、骨骼肌、血管、淋巴管以及原始间叶细胞的肿瘤，其具有分布广范、种类繁多、形态又相似等迷惑特点，病理医生不得不在形态学的基础上加做一些检查来帮助诊断。

现有协助诊断的手段如下：

手段一：免疫组化技术

检测蛋白层面，直接展现表达结果，以确定细胞分化来源，少量指标用于检测遗传学改变，应用较为普遍，价格相对便宜，尤其适合在基层单位广泛开展。因为不能检测未知的融合蛋白，无法区分融合伴侣，有相当一部分抗体在某些不同类型的肿瘤间存在交叉反应或异常表达，所以优势较为局限性。

手段二:荧光原位杂交（FISH）技术

越来越多的软组织肿瘤涉及染色体易位，并产生融合基因。因此可以采用FISH 检测基因重排。

1.采用断裂分离探针：可帮助判断某种基因是否重排，但不能明确具体的融合基因。

2.采用融合探针：此探针优于采用断裂分离探针检测基因重排，但检测较为局限。

3.部分软组织肿瘤涉及基因扩增或缺失，也可通过FISH检测。

FISH检查灵敏度高、特异度高、空间定位准确 ,并且也能对二代测序检测中获得的分子检测结果加以验证，但可检基因有限并且需要多次的检测。

手段三：一代测序（Sanger测序）

部分软组织肿瘤具有相关的基因突变，往往只需进行单基因检测，通过检测这些基因突变对肿瘤的诊治疗具有重要参考价值，例如，检测胃肠间质瘤 KIT/PDGFRA 基因突变等。

手段四：逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）

其方法仅限于检测已知的融合基因，不能发现新的融合;无法识别未知和罕见的融合基因，因此RTPCR常常作为分子检测验证手段。

手段五：二代测序（NGS）

（1）DNA测序，检测范围更广，可同时检测所有位点的多种变异类型如点突变、小片段插入或缺失等，但部分融合基因无法检测出。

（2）RNA测序，能在DNA测序的基础上给予补充，能检测到DNA测序未检测到的融合，但对样本质量要求甚高。

因此，推荐联合采用 DNA 测序和 RNA 测序检测，以指导临床靶向和免疫治疗，但昂贵的检测费用又无疑增加了患者的经济负担。

以上任何一种“手段”都不能够完全接近于完美，它们之间扮演着相互补充、相互验证的角色。

如果病理医生在没有采用任何以上这些“手段”的情况下，面对软组织肿瘤的诊断也将举步维艰、寸步难行。